Принципы микробиологической диагностики
Лабораторная диагностика хламидиоза основана на прямом выявлении возбудителя или его антигенов, данных серологии с обнаружением антихламидийных антител.
При выявлении хламидийной инфекции у женщин необходимо обследовать и партнеров, имевших с ними половой контакт. При этом анализ должен браться специальной щеточкой из цервикального канала шейки матки после удаления слизистой пробки.
Данные, полученные при выяснении жалоб и анамнестических данных, а также клиническая симптоматика, имеют весьма ограниченное значение и не должны рассматриваться в отрыве от результатов лабораторного обследования.
Для хламидийной инфекции более характерны минимальное количество или полное отсутствие жалоб, латентное, хроническое течение заболевания.
Хламидиоз часто сочетается с другими инфекциями и поэтому возможен полиморфизм симптоматики и отсутствие специфичности клинической картины.
В диагностике хламидиоза основную роль играют лабораторные методы диагностики.
Могут быть использованы бактериоскопический, бактериологический, иммунофлюоресцентное и иммуноферментное выявление антигена, ДНК-диагностика (ПЦР) и серологические методы стандартной процедурой забора материала для исследования является соскоб слизистой оболочки уретры у мужчин и цервикального канала у женщин. Кроме того, в зависимости от локализации патологического процесса производят исследования мазков из прямой кишки, конъюнктивы, носоглотки.
При наличии клиники проктита и подозрения на хламидиоз целесообразно провести исследование ректального мазка.
До настоящего времени «золотым стандартом» при диагностике урогенитального хламидиоза является культуральный метод, предусматривающий культивирование хламидий на куриных эмбрионах или клетках Мс Соу.
Выявление хламидий культуральным методом позволяет не только выявиь наличие возбудителя, но что особенно важно возбудителя, способного к размножению и внутриклеточному паразитированию
Метод обладает высокой специфичностью, но его постановка трудоёмка, требует специального оборудования, квалификации персонала, а главное безупречного выполнения всех параметров методики. Проведение культивирования хламидий предусматривает удаление из исследуемого образца сопутствующей микрофлоры, сохранение жизнеспособности возбудителя.
Положительный результат будет трактоваться однозначно – хламидиоз. В то же время, даже небольшие погрешности в проведении культурального метода могут явиться причиной ложно отрицательных результатов.
Кроме того, культуральный метод неинформативен при обследовании больных, получавших антихламидийную терапию, то есть он не может использоваться для оценки эффективности лечения.
Таким образом, культуральный метод при высокой специфичности, не достаточно чувствителен, трудоёмок, проведение его занимает длительное время. При этом результаты не всегда воспроизводимы.
Бактериоскопический метод заключается в выявлении хламидий и их морфологических структур непосредственно в межклеточном пространстве и в поражённых клетках.
Достаточно высокой специфичностью обладает выявление возбудителя методом иммуноферментного анализа.
Полимеразноцепная реакция (ПЦР) основана на определении нуклеотидных последовательностей специфичных для хламидий. В результате образуются копии специфичных участков ДНК-хламидий, которые выявляются с помощью электрофореза в геле, спот-гибридизации, сендвич-гибридизации, гибридизации in situ, с последующим выявлением методом ИФА.
ДНК-диагностика также не лишена своих недостатков.
Постановка ПЦР дорогостоящая процедура, требует специально оборудованных помещений, квалифицированного персонала, медоборудования. Даже незначительные нарушения методики и загрязнение исследуемого материала могут быть причиной получения некорректных результатов.
Однако, это не единственные недостатки ПЦР. Так, при ДНК-диагностике не представляется возможным определить какая форма хламидий обусловили детекцию возбудителя.
После проведенного лечения нежизнеспособные хламидии могут длительное время сохраняться внутри клеток. Эти нежизнеспособные хламидии могут явиться причиной положительного результата ПЦР при отсутствии заболевания.
Кроме того, следует учитывать, что даже минимальное количество хламидий, которые не смогли преодолеть резистентность, клетки-хозяина к внедрению возбудителя и тем самым представляющие собой транзитную микрофлору, также приведут к положительному результату[4].